欧美日韩专区,免费看污网站,中文字幕性爱视频,色播欧美

熱門搜索:鱟試劑,內(nèi)毒素檢測儀,內(nèi)毒素檢測試劑盒,基因重組鱟試劑,濁度法鱟試劑,顯色法鱟試劑,凝膠法鱟試劑,葡聚糖緩沖液,無熱原水,鱟試劑耗材
技術文章 / article 您的位置:網(wǎng)站首頁 > 技術文章 > 細菌內(nèi)毒素(脂多糖)的提取之PCP法、高壓超聲處理法及DMSO法的介紹

細菌內(nèi)毒素(脂多糖)的提取之PCP法、高壓超聲處理法及DMSO法的介紹

發(fā)布時間: 2022-09-09  點擊次數(shù): 1095次

一、苯酚╱氯仿╱石油醚法PCP


LPS分子鑲嵌于胞壁的外膜中,用某些化學試劑將胞壁裂解(如酚)后,LPS分子從破潰的胞壁中游離出來。由于LPS是一種兩性分子,故它們在不同溶劑中的溶解度,*取決于該分子上的親水/疏水性基團多少。S-LPS有完整的親水性О特異性側(cè)鏈,所以SLPS屬親水性分子。而RLPS,缺乏O特異性側(cè)鏈,含有完整或不完整的核心多糖和完整的類脂A,親水度不大,而易溶于有機溶劑中,故而R-LPS用酚水法提取時所得的產(chǎn)量極低。


PCP法是以90%苯酚、氯仿及石油醚406025:8所組成的單相混合提取液,這一提取方法只能將LPS及與之緊密結(jié)合的透道蛋白Porin提取出來,而其它成分則排除在提取液外。PCP法的水沉淀步驟僅能使LPS發(fā)生沉淀,而透道蛋白仍溶于苯酚中,故而PCP法所提取的LPS是一種較為純化的制劑。


PCP法對制取R型細胞的LPS產(chǎn)量十分滿意,且無核酸污染,蛋白質(zhì)含量也僅在0.11 %間,該法溫和,在室溫520℃即可完成,制取周期較短,適用于從RaRe的細菌,可成功地提取R-LPS,產(chǎn)量也相當高。故PCP法是研究R-LPS的有用方法。應必須注意的是在PCP法中,每一步操作均不應使用鹽類,如MgCl2、CaCl2,否則會嚴重影響產(chǎn)量。



二、高壓超聲處理法


以某些物理方法(如超聲波處理菌體細胞,使其*破裂,可增加繼后提取方法的*性,從而可使LPS的產(chǎn)率增加。Richard1983研制了一種既可提取光滑型又可提取粗糙LPS的新方法。該方法采用了高壓處理15000Ib/in2細菌的方法,粉碎菌細胞,繼又用超聲波處理,促進碎片*裂解,再以DNa s eRNa s e處理,消化核酸。再加入蛋白酶去消化蛋白質(zhì),離心12000xg,濃縮干燥。如此制得的LPS,產(chǎn)量為菌體的5181%(按測脂肪酸、糖和KDO),蛋白質(zhì)為0.1%、核酸1 %、25%,純度較高,產(chǎn)量比酚水法高7倍,比PCP法高2倍。


所得LPS經(jīng)各種免疫化學分析,均提示用此方法提取的LPS其抗原結(jié)構(gòu)完整。其不足之處是堿性條件上的加熱以前認為這一處理在于除掉蛋白質(zhì),特別是對于有些細菌如綠膿桿菌有用,但對別的細菌恐屬多余。應當指出的一點是,堿性加熱條件使類脂體A上的脂肪酸酯降解。另外個不足之處是,此方法較為復雜,不易被一般實驗室采用。


三、DMSO


Adams介紹了一種較為簡單的LPS提取方法。該法應用二甲亞Dimethyl SulfoxideDMSO作為主要提取試劑。以胞壁原料提制LPS。主要步驟為將預先制取的干燥胞壁以60DMSO提取水洗,酸化丙酮處理,冷凍干燥。DMSO法提取的LPS產(chǎn)量是酚水法的10倍,但蛋白質(zhì)含量很高45%) 。


  • 聯(lián)系電話電話400-687-1881
  • 傳真傳真010-87875015
  • 郵箱郵箱f.he@bio-life.com
  • 地址公司地址北京市大興區(qū)中關村科技園區(qū)大興生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)基地華佗路50號院18幢樓2層
  • 公眾號二維碼
© 2024 版權(quán)所有:科德角國際生物醫(yī)學科技(北京)有限公司(m.zjningli.com)   備案號:京ICP備2021012680號-1   網(wǎng)站地圖   技術支持:化工儀器網(wǎng)       

聯(lián)


色综合99久久久无码国产精品| 亚洲综合五月婷婷网| 日本美熟妇东京热| 好色男女| 无码人妻少妇久久中文字幕| 毛片免费观看| 我要看一级黄色片| 国产一区二区黄片| 中文字幕一区二区人妻电影| 牛牛影视AV| 涩爱综合人妻| 欧美一乱一性一交一视频| 婷婷激情四射五月天| eeuss国产一区二区三区四区| 九色资源网| 欧美性猛交XXXX免费看蜜桃| 三级片AV在线| 欧美一级区| 老司机久久精品| 久久黄色一级片| 国产你懂得| 中国四大美女是哪四个| 乱伦中文字幕91| 国产日韩欧美一区二区三区四| 欧美精品k| 99热自拍导航| 韩国三级bd高清中字在线观看| 亚洲欧美综合区自拍另类| 国产一区二区三区影院| 伊人九九| 樱花草在线社区www韩国| 国产黄色视频网站| 日韩精品视频播放| 亚洲草逼| 超碰麻豆9| 综合色久九色| 亚洲免费在线视频观看| 操欧美BBAV| 一区二区欧美亚洲| 激情欧美网站国产| 亚洲国产精品VA在线看黑人张液|